卵巢癌耐药细胞的建立就是体外低浓度培养细胞,逐渐诱导耐药。可是整个过程耗时长,易受污染,成功率一般。后来了解到还可以通过裸鼠荷瘤的方式,给裸鼠腹腔注射药物逐渐诱导耐药,取瘤组织研碎制成细胞悬液在再培养几代可得肿瘤细胞。这样时间就缩短了很多~而且不受污染等条件限制。卵巢癌耐药细胞的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身生物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp(或P-170)糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受。
卵巢癌耐药细胞通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为耐药细胞,卵巢癌耐药细胞是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。卵巢癌耐药细胞的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限细胞系,如可以连续培养,则称为连续细胞系,培养50代以上并无限培养下去。所以卵巢癌耐药细胞是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。从培养代数来讲,可培养到40-50代。如果不能继续传代或传代数有限,称为有限细胞株;如果可以连续传代,称为连续细胞株。对于人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
卵巢癌耐药细胞注意事项:
1、观察细胞好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们。