免疫荧光分析技术是新发展起来的精密的免疫标记检测技术,与传统的酶联免疫法及金标法相比,免疫荧光分析技术灵敏度高,特异性强,操作方便,不用放射性物质作为标记物,因此具有无放射性、标记物稳定、便于长期保存、试验重复性好、分析速度快、样品用量少及标准曲线量程宽等优点[1]。荧光分析法是测定物质吸收了一定频率的光以后,物质本身所发射的光的强度。荧光的强度与物质数量之间存在正比关系,可通过测定荧光的光谱和荧光强度,对物质进行定性或定量的分析。免疫荧光分析技术是目前生物医学检验中常用的快速分析技术,在微生物、病毒抗原或抗体检测、激素检测、肿瘤标志物等检测领域具有广阔的应用前景。
技术原理:
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)医学教育|网搜集整理。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
免疫荧光测定的应用:
目前,时间分辨荧光免疫测定、荧光偏振免疫测定和荧光酶免疫测定都有全自动化测试的分析仪器,这些仪器具有试剂和样本条码识别系统,能自动加样、温育、洗涤、分离、测定荧光强度、处理数据和报告结果。
时间分辨免疫荧光测定应用范围十分广泛,包括蛋白质、激素(肽类激素、甲状腺激素、类固醇激素等)、药物、肿瘤标志物、病原体抗原/抗体等;荧光偏振免疫测定特别适用于血清或尿液中小分子物质的测定,目前已有数十种治疗药物和成瘾药物、维生素、激素及常规生化项目可用荧光偏振免疫测定进行分析和定量测定;荧光酶免疫测定可用于多种抗原抗体的检测,如病毒抗体、细菌及毒素抗原、激素、肿瘤标志物、过敏原、心肌损伤标志物和凝血因子等。