ELISA生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中
现代的科学技术是日新月异的,试验试剂产品也都在不断的优化和改善。ELISA试剂盒使用抗原抗体之间专一性结合的特性,对样本进行检测的试验办法,经过底物显色深浅代表待测物在样本中含量的多少。
ELISA试剂盒操作步骤:
1、加标准品:在酶标包被板上设标准品孔,依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)。
2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl,然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6、加酶:除空白孔外每孔加入酶标试剂50μl。
ELISA试剂盒在根底中具有的特性:
1、水溶性、低黏度、无腐蚀、不易燃、不污染环境。
2、所采用的办法特异性好,活络度、准确度、精密度。
3、所用规范品或规范参阅物契合推荐规范和要求。
4、贮存期至少为1年。
用途:
1、其抗原抗体反响具有高度的特异性。
2、将酶催化反响的扩大效果和抗原抗体亲和反响的高度专一性、特异性相结合,以酶标记的抗原或抗体作为首要试剂进行免疫测试,所以具有很高的活络度。
3、完成了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的地点部位,或在微克、乃至纳克水平上对其进行定量。