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细胞系的细胞培养步骤,分享给大家
更新时间:2021-01-26 点击次数:1129次
  细胞系中筛选出来细胞株的有特殊属性的比如无线增值的。细胞株:通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株,也就是说,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
 
  细胞系是原代细胞经传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续或无限,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限,如可以连续培养,则称为连续,培养50代以上并无限培养下去。人类zhongliu细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
 
  细胞系对于生物医学研究是非常有价值的工具。然而,它们作为正常或患病组织模型的有效性有赖于它们真的是研究人员所认为的组织类型和物种。ATCC细胞系作为体外模型而被广泛应用于生物医学研究。正确数据的获得常常依赖于细胞系的特性,尤其是当它用来替代其来源者的组织时。
 
  细胞系的细胞培养步骤:
 
  一.培养基及培养冻存条件准备:
 
  1)准备培养基;北美胎牛血清,10%;双抗1%。
 
  2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
 
  3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
  二.细胞系的菌种处理:
 
  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
 
  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
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