肝癌耐药细胞的建立就是体外低浓度培养细胞,逐渐诱导耐药。可是整个过程耗时长,易受污染,成功率一般。后来了解到还可以通过裸鼠荷瘤的方式，给裸鼠腹腔注射药物逐渐诱导耐药，zui后取瘤组织研碎制成细胞悬液在再培养几代可得肿瘤细胞。这样时间就缩短了很多~而且不受污染等条件限制。肝癌耐药细胞的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身生物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp(或P-170)糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受。
肝癌耐药细胞培养小技巧:
1.买细胞要去靠谱的地方买，比如ATCC或者然泰生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2.不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基。
3.发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
4.不同细胞生长周期不同。有的生长很快，比如说MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢，比如BT474，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
5.对于娇弱的细胞，就得细心呵护。胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住，是每天。
