肝癌耐药细胞的建立就是体外低浓度培养细胞,逐渐诱导耐药。可是整个过程耗时长,易受污染,成功率一般。后来了解到还可以通过裸鼠荷瘤的方式，给裸鼠腹腔注射药物逐渐诱导耐药，zui后取瘤组织研碎制成细胞悬液在再培养几代可得肿瘤细胞。这样时间就缩短了很多~而且不受污染等条件限制。肝癌耐药细胞的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身生物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp(或P-170)糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受。
实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基，10%血清浓度即可，在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物，或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子。
肿瘤细胞对化疗药物产生耐药是目前导致临床化疗失败的主要原因，成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此，探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程，它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科，这就决定了肿瘤细胞对化疗药物产生耐药的机制是复杂的，因此体外建立肝癌耐药细胞仍然是研究肿瘤细胞耐药机制的重要方法。
肝癌耐药细胞注意事项：
1、观察细胞在低倍镜(4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。
