荧光定量PCR就是实时检测PCR每个循环扩增产物相对的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析。荧光定量PCR是通过多扩增反应中每一个循环产物的荧光信号进行实时监测，并分析指数期的扩增情况来实现对起始模板的定量分析。该技术使用的荧光来源包括荧光探针和荧光染料。前者是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加，因此特异性更高；而后者则能结合所有的双链DNA，因此不必因模板的不同而特别定制，通用性强，但需要保证扩增产物的特异性。
下面为您介绍荧光定量PCR的显色和比色分析：
显色是elisa中的温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时间一般不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色状况适当缩短或延长反应时间，及时判断。
比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。在加底物液显色前，先将软板边缘剪净，这样，此板就可*平妥坐入座架中。
比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔(未经任何反应仅加底物液的孔)和空白孔(以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔)，以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。
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