人肝癌氟尿嘧啶耐药株属于贴壁型细胞，如果漂浮的死细胞多，说明细胞有很多老化的，建议每次传代的时候，在用胰酶消化之前，用PBS将细胞漂洗一遍，胰酶消化的时间要把握好，37℃2-3min即可，及时终止反应，否则胰酶消化过度对细胞损伤较大，也会有很多死细胞出现的;吹打细胞的动作要轻柔。
待细胞生长状态良好时，可进行人肝癌氟尿嘧啶耐药株细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人肝癌氟尿嘧啶耐药株细胞复苏操作步骤：
1．将冷冻管迅速由液氮转入到37℃水浴中，冷冻管的顶部保持在水面以上以避免任何污染，不定时搅拌加速解冻；
2．当细胞*解冻后，用含70%乙醇的纱布擦拭冷冻管消毒；
3．将解冻后细胞转移到含4℃预平衡培养液的试管中；
4．细胞悬液在4℃下200磄离心10分钟；
5．弃上清，将细胞重新悬浮在新鲜培养液中；
6．将细胞转移到细胞培养瓶，CO2孵箱中培养；
7．是用倒置显微镜检查细胞存活率以及细胞密度，如果细胞密度过高，用培养液稀释至适宜浓度。
