结肠癌耐药细胞株开发涉及细胞培养及转染，单细胞克隆及单克隆源性验证，蛋白表达及结构特征筛选及鉴定，蕞终获得优质的细胞株。
 

　　结肠癌耐药细胞株广泛用于许多重要的应用，包括生物制品(如重组蛋白和单克隆抗体)生产、药物筛选和基因功能研究。开发结肠癌耐药细胞株的过程通常始于将所需的质粒转染至选定的宿主细胞，一般是CHO或HEK 293细胞。转染后，研究人员随后筛选和定量分析高表达的细胞克隆。
 

　　一旦检测到这些高产细胞株，便进一步对这些细胞和其产生的蛋白质进行验证。传统上用于细胞株开发的手动筛选方法耗时且需要大量劳力，因此对于此类工作，存在对高通量、自动化解决方案的巨大需求。
 

　　结肠癌耐药细胞株稳定整合试验中需要考虑的几个关键因素有：
 

　　1)，外源插入片段的拷贝数。多数情况下，低拷贝甚至是单拷贝可以减少人为实验因素的干扰。
 

　　2)，整合的几率，这不仅决定了稳定株筛选的难易程度，而且还可以帮助人们更容易得到混合稳定株。
 

　　3)，整合位点的转录活跃度，决定了稳定株中外源片段的表达质量。理想的状况是单拷贝，但转录活性比较高。
 

　　4)，整合后的稳定性。不同的整合位点决定了外源片段在染色体中的稳定性，有些区域易发生重组或者丢失，从而导致稳定株再次丢失的情况。
 

　　5)，最好使用混合稳定株或者获得多个不同单克隆稳定株。因为稳定整合往往伴随这插入失活宿主内源基因，所以实验时通过使用混合稳定株，或者对多个单克隆稳定株进行比较，可以帮助研究人员获得更精确的实验数据。