荧光定量PCR就是测定样品中某个模板的起始量ct值。但在实际操作过程中,由于之前DNA提等步骤,各个步骤存在不同的效率,在实验过程中也存在加样误差、各孔温度差等影响,每个样本的Ct值并无法真实反映每个样品中初始模版的绝对量,这就使得我们无法对不同处理的样本进行分析评价。因此,我们需要一个参考标准对每一个样本进行校正,排除其他无关因素带来的的影响。
普通PCR仪与荧光定量PCR有什么差异?
普通的PCR仪比荧光定量PCR仪少了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段,而实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的,定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作,反之就可以了,况且这样代价太大了,一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不能互相取代。湿度传感器探头,不锈钢电热管PT100传感器,铸铝加热器,加热圈流体电磁阀。
普通的基因扩增仪只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多,而且运行成本也要低很多。不过不能直接得到扩增结果,还需要做电泳检测。实际中检测遗传疾病,品种分子标记筛选,甚至亲自鉴定等都可以由普通PCR仪完成。
但是,某些需要定量的实验就必须用到实时定量PCR了。比如检测某些病原物的数量(血液乙肝病毒复制程度),特定基因的表达量(比如结合反转录做的RNA定量分析),某些基因在染色体组中拷贝数等等。荧光定量PRC一般不需要对扩增产物进行电泳分析,操作相对简单些,但是耗材实在是贵。
简单来说,看有没有用普通PCR仪,看有多少用荧光定量PCR。基因扩增仪只能扩增,不能检测,便宜。荧光定量PCR仪除了扩增,还能在扩增的同时检测DNA发出的荧光信号,试剂和仪器都更贵。