mRNA干扰慢病毒构建
实验原理:
慢病毒属于逆转录病毒科,名称源自该种病毒长达数年的潜伏期,其中zui为人所知的是人类免疫缺陷病毒(HIV-1)。HIV-1直径约120nm,含两条正链RNA,可有效的进入细胞核中,对分裂期细胞及非分裂期细胞均具有很高的感染效率。对以HIV-1为基础进行的慢病毒载体的改造,主要是去除致病基因减少辅助质粒与载体质粒的同源性,zui终体现在滴度、生物安全性和外源基因表达效率上的提高,见结构示意图。
慢病毒包装系统特点:可通过顺式作用元件将携带的基因运送到细胞核,将要表达的基因序列整合到细胞基因组中,后续可以通过筛选稳转株获得持续稳定的高表达。
服务流程:
1、客户提供背景资料,我们共同探讨服务的可行性和技术路线。
2. 签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等,客户需要预付实验总费用的50%-70%作为实验预付款。
3. 实验结束,按合同内容交付结果。
实验流程:
1. shRNA表达载体的选用:客户可以根据实验的需要选用不同的慢病毒载体。
2. 设计RNAi靶序列:
3. shRNA慢病毒载体构建:合成模板、双酶切shRNA空载体、连接与转化、测序鉴定、质粒制备及定量。
4. 提供实验结果: 我们将提供包装纯化好的各靶点的慢病毒颗粒、测序结果、滴度检测结果和病毒构建包装纯化实验报告等。
收费标准/服务周期/提供结果:
详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验等,能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务!
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