外泌体提取
服务简介:
外泌体是一类几乎所有类型的细胞都能分泌的大小介于30-150nm的含有RNA和蛋白质等物质的微小囊泡结构,广泛存在于各种体液中参与调控重要的细胞生理活动。Exosome携带蛋白质包括源细胞非特异性和源细胞特异性两类蛋白分子。前者可能与exosome的生物发生和生物学作用有关,另一类是特殊蛋白质,这类蛋白质只存在于某种特殊的细胞分泌的exosome,而这些特定细胞源的exosome与其生物学功能有着密切。包含的RNA大部分为miRNA,其余为rRNA、lncRNA、DNA和其他RNA。
服务流程:
1、样品收集处理
2、外泌体提取、质检
3、RNA抽提、质检
4、高通量测序
5、标准信息分析
6、高级信息分析
7、表达差异分析和定制化信息分析
服务要求:
1、准备新鲜或冻存的血液上清液置于冰上。如果样品是冻存的,放置于25-37 ℃水浴锅直至血液*溶解后,置于冰上。
2、小心将血液上清液,过0.45um滤膜,收集过滤液。
服务流程:
1、吸取0.5ml的血液到一干净的管子,56℃水浴15分钟
2、4 ℃ 12000rpm离心5分钟,取上清至新的离心管
3、向该离心管中分别加入0.05ml的提取液1和0.05ml的提取液2。
4、上下颠倒管子或用移液枪吹打,直至血液上清液和提取液*混匀。
5、在冰上孵育2小时。
6、4 ℃ 12000rpm离心10分钟。
7、小心,快速吸去上清,加800ul的提取液 3,用移液枪反复吹打管底沉淀。
8、4 ℃ 12000rpm离心10分钟。
9、小心,快速吸去上清,用30ul 重悬液吹打,溶解管底外泌体沉淀。
10、用于下游的蛋白、核酸、和其他分析。未及时使用时,分装后-80 ℃保存。
注意事项:
A、本试剂盒不适用于从其他体液或细胞上清中分离外泌体。其他相关体液的外泌体提 取试剂盒是根据不同 生物样品进行了相应的提取优化,请分别订购。
B、通常情况下,0.25-0.5ml血液就能提供足够的外泌体样品用于常用的下游分析。
C、对于从大体积的血液样品中(>5ml)分离外泌体,建议按照1ml/份进行相应的分装,提取以确保充分的外泌体提取效率。
收费标准/服务周期/提供结果:
详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验等,能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务!
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外泌体提取/外泌体
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