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细胞瞬时转染/瞬时转染/转染

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更新时间: 2017-08-02

细胞瞬时转染/瞬时转染/转染
细胞转染的基本原理将外源DNA克隆到载体上后导入细胞,借助宿主细胞表达载体上的目的片段,从而使目的基因在细胞中发挥功能。目前转染方法有多种,如脂质体转染法、磷酸钙-DNA共沉淀法、电穿孔转染法、腺病毒感染等。

产品介绍:

 

细胞瞬时转染

服务简介:

     细胞转染的基本原理将外源DNA克隆到载体上后导入细胞,借助宿主细胞表达载体上的目的片段,从而使目的基因在细胞中发挥功能。目前转染方法有多种,如脂质体转染法、磷酸钙-DNA共沉淀法、电穿孔转染法、腺病毒感染等。
      常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,另一类是稳定转染,前者转染的外源DNA不整合到宿主染色体中,通常表达只持续几天,一般在转染24-72小时后检测。后者转染的外源DNA将整合到宿主染色体中,可持续性表达,一般可用于稳定细胞株的构建。
     本公司使用商用化的lipofectamine2000作为转染试剂,所有实验步骤及试剂按照厂家建议的用量。实验中使用转染试剂在常温条件下同待转染质粒/RNA在培养基中组装成复合体,按照一定的比例将上述装配产物加入到对数生长期的细胞中。待培养一段时间后,可结合下游实验检测项目。

 服务流程:

  1. 质粒:
    a. 进行预实验,通过转染含有报告基因的质粒优化转染条件;
    b. 转染条件确定后,按照客户方案进行转染;
    c. qPCR或Western Blot检测转染效率。
    (2)SiRNA:
    a. 根据基因序列,设计并合成siRNA;
    b. 进行预实验,通过转染带有荧光标记的阴性对照siRNA优化转染条件;
    c. 通过qPCR和Western Blot验证siRNA的沉默效率,筛选siRNA*使用浓度。

客户提供:
待转染细胞株及细胞培养的相关信息,待转染的质粒信息,目的蛋白一抗;待转染的SiRNA,预测被调控基因的蛋白的抗体。
交付内容:
瞬时转染的实验报告单,含实验原始实验图片、实验方法、siRNA序列等。

收费标准/服务周期/提供结果:
详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。

【本公司合作项目】
慢病毒,腺病毒,RNAi类,分子生物实验,病理实验,免疫学实验,细胞实验,动物实验,蛋白组学实验等,能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务!

详情请咨询:

【公司】www.mxbio。。cn
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【公司】shmxbio
【公司地址】上海市闵行区沧源路1200号2218室

细胞瞬时转染/瞬时转染/转染

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