细胞成骨诱导
成骨诱导培养液配备与诱导操作:
1、准备含10%FBS的α-MEM培养液;
2、在备好的α-MEM培养液中添加50μM 抗坏血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松;
3、准备6孔培养板,将P4细胞按照5×103个/平方厘米的规格接种于原始α-MEM培养液中;
4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成骨诱导培养液;
5、每三天换液一次,细胞长至7天时进行碱性磷酸酶染色;
6、二十八天后再进行矿化结节的茜素红染色。
素红染色方法介绍:
1、去除细胞当前使用培养液,使用PBS清洗两次;
2、使用10%甲醛室温固定15分钟,完成后使用重蒸馏水冲洗两次;
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素红染色液,室温孵育20min并轻微振荡;
4、清除掉没有*结合的染料,用重蒸馏水漂洗并振荡5min重复4次;
5、倾斜放置2min,吸取多余的重蒸馏水;倒置显微镜观察拍照记录。
实验注意事项:
客户提供:
细胞种类和诱导分化细胞类型。
收费标准/服务周期/提供结果:
详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
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