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实验目的:通过TRAP-PCR银染法检测鉴定样品中端粒酶活性
实验原理:端粒DNA与细胞的寿命密切相关,而合成又依赖于端粒酶。正常人体细胞中不能检测出端粒酶活性的表达,而肿瘤细胞株及大多数肿瘤组织中的端粒酶活性却异常的高表达。TRAP-银染法端粒酶活性检测试剂盒是采用端粒重复序列扩增的方法,利用银染技术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔6 bp的梯状条带,
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细胞Hoechst凋亡染色/细胞凋亡检测
Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激发。都在461nm处发出蓝靛色荧光光。Hoechst染色时无需用DAB来显色,它直接结合细胞的DNA ,经过紫外光激发后发出蓝色荧光。
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Tunel检测/凋亡检测
TUNLE即原位末端转移酶标记技术。凋亡细胞的DNA双链断裂或一条链出现缺口,产生一系列3′-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)作用下,将脱氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物标记到DNA的3′末端,从而进行凋亡细胞的检测。